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Seguem os iniciadores que usaremos e dados do protocolo experimental.

  • MCGp.F1:  ACA CCA TGG GAG CTG GTA AT
  • MCGp.R1:  CTT C(A/T)T CGA CTT (T/C)CA GAC CCA AGG CAT
  • MCGp.F2:  GTT CTT TGA AAA CTG AAT
  • MCGp.R2:  GCA TCC ACC A(A/T)A (A/T)AC TCT

(Takara #6601) PCR Mycoplasma Detection Set.pdf

​Na pasta a seguir há informações, incluindo resultados de alguns experimentos previamente efetuados com os mesmos iniciadores: Mycoplasma

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Protocolo básico, conforme descrito em dissertação do ViriCan:

"As células utilizadas nos experimentos foram também verificadas quanto a ausência de contaminação por micoplasma por meio de reação em cadeia de polimerase (Polymerase chain reaction – PCR) utilizando iniciadores previamente descritos (Uemori et al. 1992). Para a reação foram utilizados Tampão PCR 10x (100mM Tris-HCL, 500mM KCl, pH8,5), 50mM MgSO4, 20mM dNTP, os iniciadores MCGP (S – ACACCATGGGAGCTGGTAAT; AS – CTTCATCGACTTTCAGACCAAGGCAT), em concentração de 30μM, e 1U Taq DNA Polimerase convencional. A reação foi realizada utilizando as condições 95°C – 3 min (1x); 94°C – 30s, 55°C – 30s, 72°C – 30s (35x); 72°C – 10 min (1x); 4°C - ∞."

ROCHA, Viviana Loureiro. Estabelecimento de modelo in vitro para estudo de efeitos de miRBARTs do EBV em células humanas de epitélio nasofaríngeo. Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022. Disponível em: <https://osf.io/yrfnh>.

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